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偏光顯微鏡的應用
上海光學 > 技術資料    2012-9-13 9:34:14

 

偏光顯微鏡的應用

偏光顯微鏡在物理化學中校用于方位角旋轉的測定和雙折射介質中相仿差的測定。而它的最精確的定量應用是在礦物學和巖石學中光袖的準確斷定,在雙折射基礎上晶體的鑒定是省石學和礦物學中大量的經常的工作。而在生物學和醫學中偏光顯微鏡被廣泛應用的可能性是比較小的,部分是因為生物學標本的各向異性比起無機物標本是比較小的。另外,具有多于一個光軸的物質在生物學巾也很少發現。

在生物體中,不同的纖維蛋自,例如膠原蛋白、彈力纖維(在—‘定的條件下)、張力纖維和肌肉中的肌原纖維等結構顯示出明顯的各向黨性,它們都具有在長軸—亡的雙折射性。這些蛋白質在應用其他技術測定之前,已經使用偏光顯微鏡得到了在這些纖維中分子排列的詳細情況。同樣,用電子顯微鏡n經看到的神經周圍由脂類和蛋白質組成的儲期的可變雙分子膜層結構,現在己用偏光顯微鏡非常精確地匠災了,采用部分交叉的棱鏡觀察蘇木核染色的人延髓神經細胞切片時,在常規顯微鏡下不明顯的細胞間神經纖維的雙折射髓鞘變得十分明顯。

對于具有品體構造的生物學材料,例如淀粉粒,應用偏光匝微鏡也可以進行觀察。例時,利用偏光顯微鏡還可以研究動物和植物的活體細胞,最近紡距絲的比較微弱的雙折撲性質(起因于紡題絲微管中蛋白質分子的定向排列).已經在很大程度L被用來研究細胞在不同分裂時期結構上的定性和定量變化,并且使用又有高消光但的偏振棱鏡和牧強的光源,用縮時攝影可以記錄分裂周期中紡額體的變化。在一些特殊的生物學材料中,例如具毛•高雙折射的內耳平衡器中的聽石,就會顯不出清晰的偏振光效應(圖11.6)。

在偏光顯微鏡使用中應注意下例事項;

考慮到雙折射現象的重疊,用于偏光顯微鏡的切片厚度決不能超過10μm;組織塊

應盡可能地切成三個互相垂直的平面;粘著切片材料時不應使用蛋出——甘油粘著劑;由于石蠟的存在會嚴亞地破壞雙折射,因此使用二甲苯溶蠟的常規方法對于除去切片中殘存的石始是遠遠不夠的,必須采用把切片在本Ig——氯仿中50℃下處理2叫、時的方法徹底除去殘留的石蠟,用這種方法也可以除去現代包埋介質中的塑料。另外在用于,偏光顯微鏡的切片中,除了石蠟外,其他的污物也應該清除干凈。

偏光顯微鏡在測定呈現很微弱曲各向異性材料的情況下,應該使用棱鏡代替片層偏振器;為了降低背景的光量,應該使用反射較差的玻璃表面以及特殊的無熒光浸油,因為背景的光會減弱雙折射現象。

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